透析袋產品使用方法

透析袋產品使用方法

透析通過在半透膜兩側,從高濃度一側向低濃度一側的擴散過程,去除小分子。只有小于膜孔徑的分子可以通過膜,在全部料液中達到平衡。一旦達到平衡后,底物不再有“凈”移動,因為分子將以相同的速率,通過膜孔,進入透析單元或出來。相反,不能通過膜孔的大分子,將被截留在其所處的膜的原有一側。

為去除不需要的底物,需要更換透析緩沖液,以形成新的濃度梯度。更換緩沖液后,顆粒會繼續從高濃度一側向低濃度一側移動,直到再次達到平衡。每次更換透析緩沖液,膜內部的底物按兩個部分的體積差,被進一步純化。例如,在100mL的透析緩沖液中透析1ml的樣品,平衡時,可透析底物的濃度將被稀釋100倍。每更換100mL新的緩沖液,將使樣品再稀釋100倍。如更換3次100mL的透析緩沖液,且假定每次更換透析緩沖液前,均達到完全平衡,樣品種底物的稀釋倍數將為100x100x100,即1,000,000倍。

影響透析速率的因素有很多,包括:1)透析緩沖液體積;2)緩沖液組成;3)緩沖液更換次數;4)透析時間;5)溫度以及6)顆粒粒徑與膜孔徑的比值。相比僅稍小于膜孔的底物,遠小于膜孔的底物會更快地達到平衡,即需要透過的分子的分子量與膜孔的截留分子量(MWCO)差別越大,透析速率越快。

從透析的影響因素可見,特定樣品所需的透析時間很難預測。為徹底更換緩沖鹽,一般實驗時,多使用樣品體積200-500倍的透析緩沖液,在室溫條件下透析6-8h,并至少更換3次透析緩沖液。最后一次更換后,再4℃透析一日。這種方法也適合用于去除生物素標記或交聯實驗中過量的標記試劑和反應副產物。

此外,由于在透析過程中,分子是雙向透過半透膜的,且每種底物達到其自身平衡的過程與其它底物無關,所以,較易發生樣品稀釋。如果某一底物的濃度在膜外側較高,且粒徑足夠小,可以自由通過膜孔,其會有從透析緩沖液進入膜內部樣品的“凈”移動。

而水是非常小的分子,可以通過幾乎所有規格透析膜的膜孔。當以較稀釋的緩沖液透析高溶質濃度的樣品時,會有通過膜進入透析膜的水的“凈”移動。當樣品中含有甘油和某些糖時,因其具有較強的吸濕性,擴散通過膜達到平衡后,會顯著影響水的滲透性,導致樣品體積變化。

為降低水的移動及其所導致的樣品體積的變化,透析時可使用“步進式”方法,即需要使用低溶質濃度緩沖液透析高溶質濃度的樣品時,可先用稍高濃度的透析緩沖液進行透析,之后每次更換緩沖液時,再逐步降低緩沖液濃度,并最終達到所需的緩沖液濃度,從而降低在透析過程每個階段,樣品和透析緩沖液的水“濃度”的影響。

四、透析袋應用:
樣品溶液的緩沖液置換和PH值的調節
去除鹽類,表面活性劑和溶劑
DNA電洗脫
濃縮蛋白質,多肽和抗體
小分子污染物清除
電泳前稀釋蛋白的制備
組織培養的提取純化
結合研究
透析袋的區別:
纖維素透析袋 再生纖維素透析袋 普通型透析袋
分子量 100-500.500-1000?5k?10k,20k,50k,100k,300k 1k,2k.3.5k,8k,10k,25k,50k 3.5k,7k,8-14k
化學兼容性 適用于:甲醇,乙醇和異
不適用于:強極性溶劑(如丙酮,甲乙酮,二惡烷)
適用于:烴,鹵代烴,醇酮,酯,氧化物,含氮溶劑。不適用于鹽酸(濃度>25%),硝酸(濃度>25%),96%硫酸,25%高氯酸,1N氫氧化鈉和10%苯酚水溶液 與很多鹽兼容,比
如CaCl2、(NH4)2SO4,還可以有分子生物學和酶學常用的水溶液和有機溶液兼容,如異丙醇、乙醇、丙酮。
有機抗性 中等
污染物水平 不含重金屬和硫化物 不含重金屬和硫化物 破化物<0.3%,重金屬<50ppm
包裝 溫型,0.05%疊氮化鈉 溫型,0.05%疊氮化鈉 干型
扁平寬度 10,16,24,31mm 10,12,18,24,28,38,45,50,53mm 25,34,44,77mm
PH范圍 2-9 2-12 5-9
溫度限度 37℃ 60℃ 可煮沸,可高壓滅菌
化學兼容性 無需預處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 無需預處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 在沸水或1mmol/l EDTA(pH?8.0)中將透析袋煮沸10分鐘

五、透析袋的選擇:

正確選擇合適的戴留分子量
線留分子量的選擇是以預留在膜內的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎的。為達到合理有效的分端,分一的兩種物質分子量的比率至少為25。選擇做留分子量的經驗法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。
選擇截留分子量值約為要保
留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留家。
正確選擇扁平寬度

進析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管園擴數距滴較長較慢。為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的進析袋。

透析袋的化學相容性
化學相容性主要用作使用指導,不作為化學相容的保證。溫度,濃度,長時間哪光等因素的改變可能影響產品的使用。建議您自設條件進行測試。

透析袋分類:

兩種材質的透析膜——纖維素酯和再生纖維素,同時提供兩種不同處理規模,標準級和生物技術級,后者更適于對純度較為敏感的生物學實驗,如涉及親和研究和核酸的實驗。此外,仕必純提供預組裝的即用型透析裝置,用于小量樣品的透析處理,這種裝置操作簡便,且可保證較高的樣品收率,可用于HPLC樣品制備、載體藥物的體外溶出等實驗。

高精度、即用型透析袋(生物級,使用前無需處理,去除了硫化物和重金屬離子,含0.05%疊氮鈉防腐液)

生物讀術進析較的制通過程或有重金屬污染及破化物,無需預處理,只需用去離子水清洗而可使用,滿足對不同實驗室透析量求,有兩種不同生物技術等級通析袋:
纖維素透析袋和再生纖維素透析鏡。
優點:
韌性膜材料,不易破損
雜質含量極少,可無需預處理,只需用去高子水清洗即可使用?的
孔徑標準均一
對溶質的吸附性小
可選分子量范圍廣100-300000
多種扁平寬度可選
特有生物技術膜,不含硫化物及金屬雜質
二、普通干型透析袋(美國聯合碳化,甘油涂層,使用前需處理)
技術參數:
△.PH穩定范圍5-9
△污染物水平·硫化物<0.3%,重金屬<50ppm
△化學兼容性:與很多鹽兼容,比如CaCl2.NHH4)2SO4;還可與分子生物學及酶學中常用的水落劑、有機溶劑兼容,比如異丙醇、乙醇和丙酮。
△蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1?ng
透析袋儲存條件:
透析袋可存放于10-29度;每次使用后將余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。

 

使用前處理:(試驗要求不高的可以使用簡易處理方法:在沸水中煮沸10分鐘左右即可使用)

1. 把透析袋剪成適當長度(10-20cm)的小段。

2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。

3. 用蒸餾水徹底清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。

5. 冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內。從此時起取用透析袋是必須戴手套。

6. 用前在透析袋內裝滿水然后排出,將之清洗干凈。

貨號 品名 產品簡介 截留分子量 產地品牌
131060 透析袋31-100D CE膜,寬度31mm,直徑20mm 100D 美國光譜醫學
131096 透析袋31-500D CE膜,寬度31mm,直徑20mm 500D 美國光譜醫學
132636 透析袋18-1000D RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm 1000D 美國光譜醫學
132640 透析袋45-1000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 1000D 美國光譜醫學
1-0150-45 透析袋45-1000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 1000D 美國MFPI
132620 透析袋18-2000D RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm 2000D 美國光譜醫學
132633 透析袋45-2000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 2000D 美國光譜醫學
132590 透析袋18-3500D RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm 3500D 美國光譜醫學
132592 透析袋45-3500D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 3500D 美國光譜醫學
1-0550-18 透析袋18-5000D RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm 5000D 美國MFPI
1-0550-30 透析袋30-5000D RC膜,寬度30mm,直徑19.1mm 5000D 美國MFPI
1-0550-40 透析袋40-5000D RC膜,寬度40mm,直徑25.5mm 5000D 美國MFPI
132579 透析袋12-8000D RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm 8000D 美國光譜醫學
132586 透析袋50-8000D RC膜,寬度50mm,直徑32mm 8000D 美國光譜醫學
132570 透析袋12-10000D RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm 10KD 美國光譜醫學
132576 透析袋45-10000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 10KD 美國光譜醫學
132560 透析袋12-15000D RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm 15KD 美國光譜醫學
132566 透析袋45-15000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 15KD 美國光譜醫學
131348 透析袋31-20000D CE膜,寬度31mm,直徑20mm 20KD 美國光譜醫學
132550 透析袋12-25000D RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm 25KD 美國光譜醫學
132554 透析袋34-25000D RC膜,寬度34mm,直徑22mm 25KD 美國光譜醫學
132544 透析袋34-50000D RC膜,寬度34mm,直徑22mm 50KD 美國光譜醫學
131420 透析袋31-100000D CE膜,寬度31mm,直徑20mm 100KD 美國光譜醫學
131450 透析袋16-300000D CE膜,寬度16mm,直徑10mm 300KD 美國光譜醫學
131486 透析袋16-1000000D CE膜,寬度16mm,直徑10mm 1000KD 美國光譜醫學
六、透析袋的使用:
下述透析程序是一個普遍的基礎透析過程。在開始透析之前應考慮到許多變數。透析樣品溶劑、膜的化學相容性、
順的截留分子量,透析溶劑、透析體積、溫度等變量都會影響透析速率,因此,一些應用中下述透析過程可能需要適
當的變化。
1.把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應為樣品體積量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的樣品)。
2.裁剪適當長度的透析管。預留一段額外長度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間
3.把透析管插入打開的透析夾,在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋。
4.由透析管開口端將樣品裝入。調整一下頂部空間的長度,夾緊透析夾。
5.把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。
6.透析要根據具體的應用需求。通常情況下,允許過夜透析。在持續透析的過程中,至少要進行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時,6-8小時和10-14小時(第2天早晨)更換透析液。在最后一次透析液的更換后要至少繼續進行2小時的透析。
注:對于高濃度污染物,樣品可能需要較長的時間透析,透析液需要更頻繁的更換。
7.透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達37℃,再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達60℃。

 

七、透析袋的貯存和保質期:
在適當的儲存情條件下,保質期為兩年。干燥的透析袋要在室溫或4℃儲存在聚乙烯袋中。未開封的透析袋4℃儲存。一旦變濕,透析袋應浸泡在下列之一的溶液中:005%疊氮化鈉,1%的苯甲酸鈉或1%%甲醛。(備注:一旦變潮濕,不要讓透析袋干燥。不斷干燥會造成孔隙結構不可恢復的倒塌)。